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                看完本篇你就會對TEV重組型蛋白酶有更多了解

                更新時間:2023-06-02  |  點擊率:1328
                  TEV重組型蛋白酶是一種常用的蛋白酶,用于在蛋白質表達和純化過程中切割目標蛋白的亞細胞定位肽或親和標簽。在此文章中,我們將探討TEV重組型蛋白酶的起源、結構和應用方面。
                 
                  TEV全稱為煙草花葉病毒(Tobacco Etch Virus)編碼的蛋白酶,其天然形式被廣泛分布于植物體內,能夠剪切寄生于植物細胞內的RNA病毒基因組。人工合成的TEV重組型蛋白酶出現于1995年,由加拿大多倫多大學的Brian Seed教授及其同事開發制備,能夠特異性地識別和切割TEV蛋白外殼上的底物序列。隨后,該產品被廣泛運用于蛋白質表達和純化中,成為生物技術領域的重要工具之一。
                 
                  該產品的結構與活性機理已經被詳細研究。它是一種由27kDa蛋白質構成的單亞單位酶,具有切割底物序列ENLYFQ/G的特異性。其結構包括一個N末端區域、一個中央峽谷和一個C末端區域。中央峽谷是TEV重組型蛋白酶與其底物序列結合的關鍵部位,其中含有兩個天然氨基酸殘基草酰胺和谷氨酰胺,能夠與底物序列內的丙氨酸和天冬氨酸發生水解反應,從而使目標蛋白被切割成為兩段。
                 

                 

                  在蛋白質表達和純化過程中,該產品常用于清除親和純化標簽或者亞細胞定位肽,從而得到純凈的目標蛋白。例如,在重組蛋白表達系統中,可以將目標蛋白與親和標簽如GST等融合表達,并在蛋白純化后進行TEV酶切割,以去除標簽;在細胞定位研究中,可以將熒光蛋白和其它亞細胞定位肽融合表達,然后用TEV酶去除亞細胞定位肽,以實現對熒光蛋白真正的定位。此外,該產品還可用于破壞蛋白質-蛋白質相互作用,或者在結構生物學中用于切割蛋白晶體以便進行X射線衍射分析。
                 
                  綜上所述,TEV重組型蛋白酶是一種常用的蛋白酶,其起源于植物病毒,結構特異性地識別和切割底物序列ENLYFQ/G。在蛋白質表達和純化、蛋白質相互作用




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